农杆菌介导鸡枞菌遗传转化体系构建

摘要：

采用含有双元质粒Plasmid4的3个农杆菌菌株(EHA105、GV3101和LBA4404)介导转化鸡纵菌(Termitomyces sp.)菌丝体,对转化体系相关的抗生素质量浓度、受体材料(菌丝球和菌丝块)、农杆菌菌株、农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间、共培养温度进行优化;并通过PCR鉴定转化子、荧光蛋白表达验证转化子的遗传稳定性.结果 表明:潮霉素(hygromycin,Hyg)最适质量浓度为50 μg·mL-1;菌丝球的转化效率优于菌丝块;EHA105菌液D600为0.7、侵染时间30 min、共培养时间48 h、共培养温度26℃时,鸡纵菌遗传转化效率最高.增强型荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,eGFP)的表达结果说明外源GFP基因已经成功整合到鸡纵菌基因组并获得高效稳定表达.构建的鸡纵菌高效转化体系为其后续相关功能基因研究和共生机制解析提供参考.

关键词：鸡纵菌;遗传转化;农杆菌;潮霉素;共培养

所属期刊栏目：28

资助基金：广东省自然科学基金;广东省重点领域研发计划

在线出版日期：2021-11-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：12-19