与灵芝酸生物合成相关的细胞色素P450基因的筛选与分析

摘要：

首先采用荧光定量PCR的方法通过分析在液体静置和振荡培养条件下基因的表达量对灵芝(Ganoderma lingzhi)细胞中14个与类固醇结合的P450基因进行筛选;其次在不同培养条件下(振荡、静置、静置钙离子添加和静置氮缺陷)通过分析灵芝酸T积累与P450基因表达的相关性对差异表达显著的P450基因进行进一步筛选;最后通过反义RNA技术对所筛选出的基因进行沉默,分析在灵芝细胞内沉默该基因对灵芝酸T含量的影响.结果表明:14个P450基因中,5个基因(cyp512a3、cyp512a 11、cyp5144n1、cyp512u4、cyp512 v2)的表达量在静置培养条件下显著高于振荡培养条件,差异表达倍数分别为7.2、3.7、3.4、89.8、63.4;cyp512v2基因的表达与灵芝酸T的积累显著相关;三株cyp512v2基因沉默效率较高的菌株中灵芝酸T含量分别比野生型菌株的含量降低13％、69％、66％,表明cyp512v2在灵芝酸T的生物合成过程中具有重要的作用.

关键词：灵芝、灵芝酸、甲羟戊酸途径、细胞色素P450、反义RNA技术

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资助基金：国家自然科学基金21566016和31360495

在线出版日期：2018-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：35-41