一种由piggyBac转座子介导高效构建稳定细胞株的策略

摘要：

构建稳定细胞株的关键是如何提高外源目的基因插入基因组的效率.piggyBac转座子(简称PB)通过"切离-粘贴"的机制实现在基因组上的转座,其本质是在基因组的不同位点间进行插入.利用PB转座子高效插入基因组的特性,并通过改造该转座系统,即分别在PB转座酶的3'端和5'端加入核定位信号肽,然后在人源胚胎肾293细胞系中评价改造后的PB转座子介导获得稳定细胞株的能力.结果表明,野生型PBase组的克隆形成率是对照组的6.7倍,3'NLSPBase组比野生型PBase组再提高1.3倍.利用人宫颈癌HeLa细胞进一步验证上述结果.可见,经改造后的PB转座子能够提高外源目的基因插入基因组的效率,实现高效构建稳定细胞株.

关键词：piggyBac转座子、稳定细胞株、基因组整合

所属期刊栏目：38

分类号：Q2(细胞生物学)

资助基金：中央高校基本科研业务费专项;教学改革项目

在线出版日期：2021-06-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：45-50