截短序列和全序列HBcAg基因以及HBV C-S融合基因的克隆与表达

摘要：

目的：构建截短序列和全序列HBcAg基因和HBc-HBsAg融合基因原核表达质粒，研究目的蛋白在大肠杆菌中的表达及其免疫原性。方法利用HBV全基因（adr亚型）质粒pUCmT-HBV分别扩增HBsAg截短基因、HBcAg截短基因和HBcAg全基因，构建成重组质粒pSK-HBs、pSK-HBc和pKS-HBV C，经DNA序列测定鉴定后，分别将HBcAg截短基因、HBcAg全基因及HBc-HBsAg融合基因亚克隆至表达质粒PET-30a，在大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达HBcAg截短基因、HBcAg全基因和HBc-HBsAg融合基因产物，采用PAGE-SDS和免疫印迹法对表达产物进行鉴定。结果成功构建了含HBcAg截短基因、HBcAg全基因和HBc-HBsAg融合基因的原核表达质粒；成功构建的质粒在大肠杆菌BL21（DE3）中能大量表达HBcAg蛋白和HBc-HBsAg融合蛋白，免疫印迹分析结果显示表达产物具有免疫原性。结论成功构建的原核表达载体在大肠杆菌BL21（DE3）中能顺利表达HBcAg蛋白和HBc-HBsAg融合蛋白，表达产物具有免疫原性，为慢性乙型肝炎特异性免疫治疗研究提供了实验基础。

关键词：乙型肝炎病毒、HBsAg、HBcAg、融合蛋白、原核表达质粒

资助基金：苏州市科学技术局科技支撑计划社会发展项目编号YJS0943

在线出版日期：2015-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：20-23