CircSLC6A6调节miR-125a-5p/PUM2轴对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响
目的:探讨环状溶质载体家族6 成员6(CircSLC6A6)调节微小RNA分子miR-125a-5p/pu-milio同源物2(PUM2)轴对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响.方法:以实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)实验检测体外培养的人子宫内膜上皮细胞与人子宫内膜癌细胞株HEC-1-A、KLE、Ishikawa中CircSLC6A6、miR-125a-5p与PUM2 的表达.将体外培养的人子宫内膜癌细胞HEC-1-A 随机分为 5 组:对照组、CircSLC6A6 敲低组(转染 CircSLC6A6 siRNA 质粒)、miR-125a-5p抑制组(转染miR-125a-5p 抑制剂)、阴性对照组(转染空载质粒和miR-125a-5p抑制阴性对照)、共转染(转染CircSLC6A6 siRNA质粒+ miR-125a-5p 抑制剂)组.以CCK-8 法及细胞克隆实验、Hoechst 33258 染色及流式细胞实验、以划痕实验及Transwell实验检测各组HEC-1-A细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭情况;以qRT-PCR实验检测各组HEC-1-A细胞miRv125a-5p及PUM2 mRNA表达;以免疫印迹实验检测各组HEC-1-A细胞凋亡蛋白(caspase-9、Bax)、上皮间质转化标志蛋白(Vimen-tin、E-cadherin)表达;以双荧光素酶报告基因实验检测HEC-1-A细胞中CircSLC6A6 对miR-125a-5p和miR-125a-5p对PUM2 的靶向调控作用.结果:①与人子宫内膜上皮细胞相比,人子宫内膜癌细胞株HEC-1-A、Ishikawa、KLE 中 CircSLC6A6 mRNA、PUM2 mRNA 表达显著升高(P<0.05),miR-125a-5p mRNA表达显著降低(P<0.05).②与对照组相比,CircSLC6A6 敲低组细胞呈现典型凋亡形态改变,细胞活力、相对细胞集落数、细胞迁移距离、侵袭细胞数、细胞PUM2 mRNA及Vimentin蛋白表达均降低(P<0.05),凋亡率、细胞miR-125a-5p及caspase-9、Bax、E-cadherin蛋白表达均升高(P<0.05);miR-125a-5p抑制组细胞各指标变化趋势与CircSLC6A6 敲低组相反;阴性对照组细胞各指标差异无统计学意义(P>0.05).与CircSLC6A6 敲低组相比,共转染组细胞的细胞核凋亡形态改变得到改善,各指标变化趋势与其相反,且差异有统计学意义(P<0.05).③在HEC-1-A细胞中CircSLC6A6 可靶向下调miR-125a-5p的表达,而miR-125a-5p可靶向下调PUM2 的表达.结论:CircSLC6A6 通过靶向下调miR-125a-5p而上调PUM2,可能促使子宫内膜癌进展,敲低CircSLC6A6通过促进miR-125a-5p分泌而降低PUM2 表达,可能抑制子宫内膜癌细胞增殖、集落形成和上皮间质转化,并促进其凋亡.
环状溶质载体家族6成员6、miR-125a-5p/pumilio同源物2轴、子宫内膜癌、增殖、凋亡、上皮间质转化
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R737.33(肿瘤学)
2023-08-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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