MiR-30a-3p靶基因的预测与验证

摘要：

目的:预测和验证miR-30a-3p的靶基因.方法:利用生物信息学方法预测miR-30a-3p的靶基因;扩增靶基因3'UTR区,与pmirGLO质粒连接构建靶基因融合表达载体后与miR30a-3p mimics共同转染到人正常滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞中,利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-30a-3p与靶基因的靶向关系;在HTR-8/SVneo细胞中转染miR-30a-3p mimics,利用Western Blot实验检测靶蛋白表达水平.结果:生物信息学方法预测结果显示胰岛素样生长因子-1(IGF-1)为miR-30a-3p靶基因之一;双荧光素酶报告基因实验显示,IGF-1基因3'UTR区中含有明确的miR-30a-3p结合位点;Western Blot实验结果显示HTR-8/SVneo细胞转染miR-30a-3p mimics后,IGF-1蛋白表达水平明显下调(P＜0.05).结论:miR-30a-3p与IGF-1有确切的靶向关系,miR-30a-3p能够负性调控IGF-1蛋白水平的表达.

关键词：微小RNA、miR-30a-3p、胰岛素样生长因子-1、双荧光素酶报告基因实验

所属期刊栏目：30

分类号：R714.2(妇产科学)

资助基金：国家自然科学基金31000660,81170582

在线出版日期：2014-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：671-674