双歧杆菌对脂多糖刺激的大鼠肠上皮细胞肿瘤坏死因子受体相关因子6、糖原合成激酶-3β和miRNA-146a mRNA表达的影响

摘要：

目的 探讨灭活双歧杆菌或双歧杆菌培养上清对脂多糖(LPS)刺激的大鼠肠上皮细胞株(IEC-6)肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)和miRNA-146a mRNA表达的影响.方法 取对数生长期的IEC-6采用随机数字表法分为LPS组、培养上清组和灭活菌组.3组细胞均用5 mg/L的LPS刺激细胞5h后,分别做下列处理:LPS组培养液中加入1 mL无菌9g/L盐水继续培养24h;培养上清组培养液中加入婴儿双歧杆菌培养上清1mL继续培养24h;灭活菌组培养液中加入1mL 1×1010 CFU/L灭活婴儿双歧杆菌继续培养24 h.反转录(RT)-PCR法检测各组细胞中TRAF6、GSK-3β及miRNA-146a mRNA的表达.结果 培养上清组细胞TRAF-6(0.72±0.05)、GSK-3β(0.46±0.14)的mRNA相对表达量均低于LPS组(1.01±0.14,1.02±0.25),miRNA-146a的mRNA相对表达量(3.05±0.40)高于LPS组(1.01 ±0.12),差异均有统计学意义(t=5.278、6.316、13.218,P=0.000);灭活菌组细胞GSK-3β的mRNA相对表达量(0.59±0.13)低于LPS组,差异有统计学意义(=4.837,P =0.000),而TRAF6、miRNA-146a的mRNA相对表达量(1.05±0.11,0.78 ±0.22)与LPS组比较,差异均无统计学意义(t=0.732、1.463,P＞0.05).培养上清组细胞TRAF6的mRNA相对表达量低于灭活菌组,miRNA-146a的mRNA相表达量高于灭活菌组,差异均有统计学意义(t=6.009、14.687,P=0.000).结论 双歧杆菌培养上清和灭活菌对LPS刺激的IEC-6均有一定的保护作用;双歧杆菌培养上清的保护作用机制之一可能是通过升高miRNA-146a,降低炎症相关因子TRAF6和损伤因子GSK-3β水平实现的;灭活双歧杆菌的保护作用可能是通过降低损伤因子GSK-3β水平实现的.

关键词：肠上皮细胞、大鼠、双歧杆菌、肿瘤坏死因子受体相关因子6、糖原合成激酶-3β、miRNA-146a

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分类号：R329.26;R739.5;S829.1

资助基金：广东省科技计划2013B021800029

在线出版日期：2019-01-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：110-113