人巨细胞病毒体外感染SD乳鼠海马神经元细胞模型的建立及钙代谢的初步研究

摘要：

目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染对原代培养SD乳鼠海马神经元细胞内钙离子的影响及其机制.方法 取24 h内出生的SPF级SD乳鼠雌雄各10只,建立原代乳鼠海马神经元单层细胞;在体外培养的第8天将生长良好的单层神经元细胞随机分为HCMV感染组、HCMV+ MK-801组、MK-801组和对照组,每组设10个复孔;在处理后24 h用Fluo-3 AM钙离子探针进行荧光染色,在激光共聚焦显微镜下检测各组神经元游离钙离子的荧光强度值.结果 接种HCMV 24 h后,神经元逐渐变圆、肿胀,4d后大部分细胞裂解消失;通过免疫组织化学在海马神经细胞的培养物中可见HCMV产生早期蛋白,呈棕黄色颗粒,苏木精复染后呈棕褐色.HCMV组神经元细胞内游离钙离子荧光强度值为215.5±14.9,高于对照组(116.4±5.9),差异有统计学意义(t=15.2,P＜0.01);HCMV+ MK-801组神经元的荧光强度值(135.5±8.6)较HCMV组(215.5±14.9)明显下降,下降率为(37.0±3.4)％,差异有统计学意义(t=11.3,P＜0.01);MK-801组的荧光强度值为88.1±4.5;较对照组(116.4±5.9)明显下降,下降率为(24.0±6.7)％,差异有统计学意义(t=-9.3,P＜0.01).结论 HCMV AD16株感染体外培养大鼠海马神经元可致细胞内的钙超载,N-甲基-D-天冬氨酸受体通道介导的钙离子内流可能是HCMV感染后神经元内钙超载的主要机制之一.

关键词：激光共聚焦显微镜、人巨细胞病毒、大鼠神经元、细胞模型、钙超载

所属期刊栏目：29

分类号：R37;R713.33;R512.63

资助基金：国家自然科学基金81270665

在线出版日期：2019-01-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：455-458