10.3969/j.issn.1003-515X.2012.19.018
靶向大鼠β-catenin基因的小RNA对离体缺氧缺血性脑损伤大鼠神经干细胞分化及Ngn1、BMP4基因表达的影响
目的 探讨缺氧缺血性脑损伤(HIBD)大鼠神经干细胞(NSCs)修复损伤的可能机制.方法 传至2、3代的SD大鼠NSCs随机为空白对照组(未转染质粒者,CON),转染阴性对照质粒组(ncNSCs)和转染β-catenin siRNA真核表达质粒组(siNSCs),分别在不同脑组织匀浆上清液中培养,以模拟HIBD及正常脑内微环境.应用免疫荧光方法观察各组NSCs的分化情况;应用反转录PCR、Western blot法检测NSCs Ngn1,BMP4基因表达情况.结果 与CON组比较,ncNSCs分化为神经元和少突胶质细胞的百分比明显增加(Pa<0.05),其中HIBD组增加较多;ncNSCs分化为星形胶质细胞的百分比显著减少(P<0.05).与CON组相比,siN-SCs分化为神经元的百分比显著减少(P<0.01),分化为星形胶质细胞的百分比显著增加(P<0.01);少突胶质细胞的分化增加,但少于ncNSCs组(P<0.01),其中HIBD组分化为神经元和少突胶质细胞较多.与CON组比较,ncNSCs Ngn1 mRNA和Ngn1蛋白的表达显著增加(Pa<0.01),而BMP4 mRNA和BMP4蛋白的表达均显著减少(Pa<0.01);与CON组和ncNSCs组比较,siNSCs的Ngn1 mRNA和Ngn1蛋白表达显著减少(Pa<0.01),BMP4 mRNA和BMP4蛋白的表达显著增加(Pa<0.01),2个siNSCs组间Ngn1和BMP4的表达差异无统计学意义.结论 HIBD时受损的脑组织可进行自主修复,与β-catenin促进ncNSCs向神经元分化有关,BMP4和Ngn1在HIBD大鼠NSCs的增殖分化中起重要的协调作用.
β-连环蛋白、RNA干扰、缺氧缺血性脑损伤、电穿孔转染
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R729(儿科学)
新疆维吾尔自治区高等学校科研计划项目XJEDU2010S22
2013-01-09(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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