神经丝氨酸蛋白酶抑制剂对新生大鼠神经元损伤的保护作用
目的 探讨神经丝氨酸蛋白酶抑制剂(NSP)在N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)诱导的神经元损伤模型中对神经元是否具有保护作用.方法 将SD新生大鼠(出生24 h内)的大脑皮质神经元在体外进行原代细胞培养,并进行神经元鉴定.培养7~10 d后选取生长良好的神经元用于实验,吸净其培养液,并随机分为3组.1.正常对照组:加入正常神经元培养液;2.NMDA损伤组(NMDA组):在正常神经元培养液中加入.NMDA,至终浓度为12.5μmol.L-1,构建NMDA神经元损伤模型;3.NsP干预组(NMDA+NSP组):在给予相同浓度NMDA的同时加入NSP,至培养液中NSP质量浓度为2.5 mg·L-1.随后将3组细胞均放人培养箱中培养24 h,收取细胞和培养液.通过免瘵荧光化学染色法观察细胞形态学变化,通过LDH释放实验测定细胞毒性损伤,TUNEL试剂盒检测细胞凋亡率.结果 与正常对照组比较,NMDA组神经元突触回缩,细胞网状结构被破坏,LDH释放量增加,TUNEL染色显示细胞凋亡率增高.与NMDA组相比,NMDA+NsP组细胞网状结构完整,LDH释放量及TLJNE[.染色阳性细胞率明显降低,差异均有统计学意义(Pa0.05).结论 NSP可以减轻NMDA对神经元的损伤,具有保护神经元的作用.
神经丝氨酸蛋白酶抑制剂、N-甲基-D-天冬氨酸、神经元、大鼠
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R729(儿科学)
国家青年自然科学基金30700908
2011-05-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1859-1861