10.3969/j.issn.1001-5930.2020.08.001
MiR-96-5p靶向调控MTSS1表达对结肠癌细胞恶性生物学行为的影响
目的 探讨miR-96-5p对人结肠癌细胞生物学行为的影响及其作用机制.方法 应用miRNA转染技术,将miR-96-5p抑制物(miR-96-5p inhibitor)及microRNA无关序列(miR-NC)转染入结肠癌HCT116细胞中;采用免疫荧光及RT-PCR验证转染效率后,分别利用MTT、划痕实验、Transwell、凋亡实验检测miR-96-5p对结肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡能力的影响;采用裸鼠皮下成瘤实验检测miR-96-5p对人结肠癌细胞成瘤能力的影响;miRNA靶基因预测软件分析miR-96-5p潜在靶目标并利用双荧光素酶报告基因和Western blot实验进行验证.结果 免疫荧光及RT-PCR结果提示miR-96-5p inhibitor显著下调miR-96-5p在HCT116细胞中的表达.MTT、划痕实验、Transwell及凋亡实验结果提示下调miR-96-5p表达显著抑制结肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力并且促进细胞发生凋亡.裸鼠皮下成瘤实验提示过表达miR-96-5p能够促进结肠癌细胞成瘤能力,下调miR-96-5p的表达能够明显削弱其成瘤能力.miRNA靶基因预测软件分析提示MTSS1可能为miR-96-5p目标靶基因;双荧光素酶报告基因验证了miR-96-5p对MTSSI的靶向调控,且Western blot实验结果提示下调miR-96-5p可明显促进MTSS1蛋白在结肠癌细胞中的表达.结论 下调miR-96-5p的表达可抑制结肠癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力并促进细胞发生凋亡,这种作用可能通过对MTSS1的靶向调控来实现.
miR-96-5p、结肠癌、MTSS1
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R735.3+5(肿瘤学)
新疆维吾尔自治区自然科学基金项目编号:2018D01C217
2020-10-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
1219-1225