人 ENO1基因的克隆及其重组逆病毒载体ENO1-pBABE-Puro 的构建

摘要：

目的：构建含人烯醇化酶1（ENO1）目的基因的重组逆转录病毒载体。方法从人癌细胞中提取总RNA合成cDNA， PCR扩增目的基因ENO1，用sal1和BamH1双酶切ENO1及pbabe质粒，然后用连接酶将ENO1插入pbabe中，最后将重组质粒转化感受态E．coli DH 5α大肠杆菌，提取质粒进行酶切鉴定及 DNA 测序。结果重组逆转录病毒载体ENO1-pBABE-Puro测序结果与GenBank上的序列完全一致，克隆的目的基因已经正确插入到逆转录病毒载体pB-ABE-Puro中。结论成功构建了含有ENO1目的基因的重组逆转录病毒载体，为进一步观察ENO1在肿瘤发生、发展中的作用及与宫颈癌细胞化疗敏感性的相关性做好准备。

关键词：ENO1基因、PCR、质粒构建、逆转录病毒载体、宫颈癌

分类号：R73-36(肿瘤学)

资助基金：甘肃省技术研究与开发专项计划项目1105TCYA016

在线出版日期：2014-03-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：4-7