生物钟基因Per1对鼻咽癌细胞CNE2侵袭迁移及与JAK2-STAT3通路相关蛋白表达的影响

摘要：

目的:探讨生物钟基因Per1 对鼻咽癌细胞CNE2 侵袭转移及上皮-间质转化(EMT)的影响,并阐述其与JAK2-STAT3 信号通路相关蛋白的关系.方法:实时荧光定量PCR法(qPCR)以及蛋白质印迹法(WB)检测CNE2 细胞中Per1 基因及蛋白水平;构建Per1 基因过表达及干扰慢病毒载体并转染CNE2 细胞;实验分为过表达组(Per1-OE)、过表达对照组(Per1-OENC)、干扰组(Per1-sh)、干扰对照组(Per1-shNC);利用划痕愈合、Transwell实验检测Per1 基因对各组细胞侵袭、迁移能力;WB检测Per1 基因对EMT相关蛋白:E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达的影响;WB检测Per1 基因对JAK2-STAT3 信号通路相关蛋白表达的影响.结果:WB和PCR结果显示:与人永生化鼻咽上皮细胞NP69 相比,Per1 在鼻咽癌细胞CNE2 中表达降低.通过构建Per1 基因过表达及干扰慢病毒载体,有效地上调和下调了CNE2 中Per1 在转录及蛋白水平的表达,并分别成功筛选出稳转细胞株.划痕实验结果显示:Per1-OE组较Per1-OENC组24 h、48 h细胞迁移率均明显下降(P =0.04,P =0.01),Per1-sh组较Per1-shNC组24 h、48 h细胞迁移率均明显升高(P =0.01,P =0.005).Transwell实验结果显示:Per1-sh组较Per1-shNC组穿过Tran-swell小室细胞数明显增加(P =0.02),Per1-OE组较Per1-OENC组穿过Transwell小室细胞数明显减少(P =0.001).WB结果显示:JAK2、p-JAK2、STAT3 蛋白在各组细胞中表达无统计学差异(P>0.05).Per1-sh组较Per1-shNC组p-STAT3、N-cadherin、Vimentin的蛋白表达下降,E-cadherin表达升高(P<0.05),Per1-OE组较Per1-OENC组p-STAT3、N-cadherin、Vimentin的蛋白表达均升高,E-cadherin表达下降(P<0.05).结论:过表达Per1 基因后可抑制鼻咽癌细胞CNE2 侵袭、迁移,使N-cadherin、Vim-entin、p-STAT3 蛋白表达下降,E-cadherin表达增加;干扰Per1 基因后则相反,进而表明Per1 基因在鼻咽癌细胞CNE2 中可能扮演着抑癌基因的角色;同时我们推测Per1 基因与p-STAT3 的表达有一定的相关性,但其具体作用机制有待进一步研究.

关键词：鼻咽癌细胞CNE2、生物钟基因Per1、JAK2-STAT3信号通路、侵袭迁移

所属期刊栏目：31

分类号：R739.62(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;贵州省卫生健康委科学技术基金项目;贵州医科大学国家自然资金培育项目

在线出版日期：2023-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2823-2828