CBX7对维持肺癌干细胞表型及化疗敏感性的影响

摘要：

目的:探讨色素框同源蛋白7(CBX7)对肺癌干细胞(LCSCs)表型和化疗敏感性的调节作用及部分潜在机制.方法:培养肺癌A549、NCL-H460 和H1299 细胞株,分选CD44+细胞进行后续实验.转染后,将CD44+LCSCs分为空白组、阴性组(转染空载体)、shCBX7(沉默CBX7 表达).细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定和集落形成实验分析细胞增殖能力和对化疗药物的敏感性,使用染色质免疫沉淀(ChIP)和双荧光素酶报告基因测定法验证CBX7 和CD44 之间的关系,Western blot检测蛋白含量.结果:成功的从A549、H460 和H1299 细胞中富集了CD44+ LCSCs,CD44+细胞百分比为 97.1%～99.5%.与CD44-细胞相比,CD44+细胞中CBX7、CD44、Sox2、Nanog蛋白表达量更高(P<0.001),且CD44+H460 细胞CBX7 蛋白表达量最高(P<0.05),可用作后续沉默CBX7 表达实验.shCBX7 组沉默CBX7 表达后,CD44+ H460 细胞的增殖率、集落形成能力、肿瘤球形成数量及细胞内CD44、Sox2、Nanog蛋白表达量明显低于空白组和阴性组(P<0.05).ChIP-qPCR实验结果显示CBX7 可与CD44 基因启动子结合.CBX7 过表达也显著增加了CD44 启动子的荧光素酶活性(P<0.05).此外,与空白组DDP(0.98±0.04)μmol/L和DOX(17.5±0.97)μmol/L相比,阴性组CD44+H460 细胞对DDP(0.87±0.03)μmol/L和DOX(16.3±1.04)μmol/L的IC50基本一致(P>0.05);与阴性组相比,shCBX7 组CD44+H460 细胞对DDP和DOX的IC50分别降低为(0.08±0.01)μmol/L和(0.43±0.03)μmol/L(P<0.05).结论:CBX7 可维持LCSCs的干性特征并提高化疗敏感性,在肺癌临床治疗中具有潜在的研究价值.

关键词：色素框同源蛋白7、肺癌、肿瘤干细胞、化疗敏感性、CD44

所属期刊栏目：31

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：海南省自然科学基金项目821RC735

在线出版日期：2023-08-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2751-2756