HSPA5通过抑制铁死亡调控宫颈癌细胞的增殖和凋亡

摘要：

目的:探讨热休克蛋白70蛋白5(heat shock 70 kDa protein 5,HSPA5)通过铁死亡对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响.方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western Blot,WB)检测HSPA5和谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)在宫颈癌和癌旁组织中的表达情况,通过TCGA数据库分析所有宫颈鳞状细胞癌和宫颈内膜腺癌(CESC)中HSPA5与患者总生存率间的相关性.体外培养人宫颈癌HeLa和SiHa细胞系,分别感染shHSPA5和shCtrl慢病毒,构建稳定的宫颈癌HSPA5敲低株,用qRT-PCR和WB检测HSPA5敲低之后铁死亡相关蛋白GPX4的表达情况.使用铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)或激活剂Erastin处理细胞后,采用CCK-8和EdU检测细胞增殖情况;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH含量;还原型谷胱甘肽(GSH)试剂盒和丙二醛(MDA)试剂盒分别测定GSH和MDA含量;流式细胞术检测细胞凋亡及活性氧(ROS)的情况.结果:与癌旁组织相比,宫颈癌组织中HSPA5与GPX4的表达显著升高,HSPA5高表达与患者预后不良有关;在HeLa和SiHa细胞中敲低HSPA5能够抑制细胞的增殖和促进细胞凋亡;同时细胞内ROS、MDA和LDH的水平上调;HSPA5敲低后GPX4的mRNA和蛋白表达水平同时降低,此外细胞内GSH的含量降低;铁死亡抑制剂Fer-1逆转了HSPA5敲低导致的ROS和LDH的含量升高并抑制细胞凋亡;铁死亡激活剂Erastin和HSPA5敲低联合增加了细胞凋亡并抑制细胞增殖.结论:HSPA5在宫颈癌组织中表达上调,通过敲低HSPA5可激活铁死亡从而抑制宫颈癌细胞的增殖和促进细胞凋亡.

关键词：HSPA5、铁死亡、宫颈癌、增殖、凋亡

所属期刊栏目：31

分类号：R737.33(肿瘤学)

资助基金：山东省自然科学基金资助项目ZR2021MH141

在线出版日期：2023-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1996-2002