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10.3969/j.issn.1672-4992.2022.07.006

miR-383-3p对鼻咽癌6-10B细胞生物学功能的影响及其可能作用机制

引用
目的:探讨miR-383-3p对鼻咽癌6-10B细胞功能的影响及其可能作用的靶基因.方法:采用脂质体介导法将miR-383-3p模拟物(miR-383-3p mimic)、miR-383-3p抑制物(miR-383-3p inhibitor)以及对照模拟物(NC)转染6-10B细胞,MTT法检测各组6-10B细胞的增殖能力,Annexin V-FITC/PI双染法检测各组6-10B细胞的凋亡情况,Transwell实验检测各组6-10B细胞的迁移能力,双荧光素酶报告基因实验确定miR-383-3p与高迁移率族蛋白A2(high mobility group A2,HMGA2)的靶向作用情况,qRT-PCR检测不同鼻咽癌细胞中miR-383-3p及各组6-10B细胞中miR-383-3p和HMGA2 mRNA表达水平,Western blot检测各组6-10B细胞中水通道蛋白5(aquaporins 5,AQP5)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)、p-CREB以及HMGA2蛋白表达水平,免疫荧光染色检测各组6-10B细胞中AQP5和核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)的荧光强度.结果:与NP69细胞相比,miR-383-3p在鼻咽癌细胞CNE1、CNE2、HONE1、HNE-1、C666-1、6-10B中的表达量均明显下降(P<0.05或P<0.001);与NC组相比,miR-383-3p mimic组能够显著抑制鼻咽癌6-10B细胞的增殖和迁移并诱导细胞凋亡(P<0.05),而miR-383-3p inhibitor组6-10B细胞增殖和迁移能力明显升高,细胞凋亡水平则明显下降(P<0.05);HMGA2是miR-383-3p的靶基因,与NC组相比,miR-383-3p mimic组HMGA2 mRNA和蛋白的表达水平下降(P<0.05),而miR-383-3p inhibitor组明显升高(P<0.05);与NC组相比,miR-383-3p mimic组AQP5和p-CREB蛋白表达量明显升高(P<0.05),而miR-383-3p inhibi-tor组明显下降(P<0.05);与NC组相比,miR-383-3p mimic组AQP5荧光信号较强,而NF-κB荧光信号较弱,miR-383-3p inhibitor组检测结果与此相反.结论:miR-383-3p可能通过负调控HMGA2的表达来抑制鼻咽癌细胞的增殖与迁移,进而促进鼻咽癌细胞凋亡,该作用可能与AQP5/CREB途径的信号通路有关.

鼻咽癌、miR-383-3p、细胞增殖、迁移、凋亡、AQP5、CREB

30

R739.6(肿瘤学)

新疆维吾尔自治区自然科学基金2019D01C172

2022-04-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

1172-1178

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