人滑膜肉瘤肿瘤干样细胞分离与鉴定

摘要：

目的:分离鉴定滑膜肉瘤(SW982)肿瘤干样细胞.方法:体外培养人滑膜肉瘤细胞系SW982,用CD133标记方法检测SW982中肿瘤干细胞的数量,用免疫磁珠分选法进行分选,分选后所得CD133+和CD133-细胞群分别进行以下实验.通过无血清悬浮培养基培养获得CD133+悬浮细胞球,并将其进行重新贴壁、重新成球以检测其自我更新能力.顺铂(cisplatin,CDDP)和阿霉素(doxorubicin,DXR)分别处理CD133+与CD133-贴壁细胞,CD133+贴壁细胞与CD133+悬浮细胞球,MTS检测每两种细胞药物敏感性.Real-time PCR及Western blotting检测CD133+和CD133-贴壁细胞干细胞相关基因ABCG2、Bmi1、c-Myc、Nanog、Oct3/4、Sox2表达情况.将CD133+和CD133-贴壁细胞分别接种于6～8周雌性BALB/c裸鼠,观察成瘤情况,并将接种后所得肿瘤进行免疫组化,观察接种瘤含CD133情况.结果:SW982细胞系中CD133含量为8.59％,CDDP、DXR对CD133+和CD133-贴壁细胞抑制具有浓度依赖性.CD133+和CD133-细胞均表达干细胞相关基因ABCG2、Bmi1、c-Myc、Nanog、Oct3/4、Sox2.相对于CD133-细胞,CD133+细胞ABCG2、Nanog、Oct3/4、Sox2表达明显升高.CD133+细胞裸鼠体内成瘤率高于CD133-细胞,CD133+接种瘤含CD133较CD133-接种瘤多.结论:SW982细胞系CD133+细胞具有高自我更新能力、高耐药性、高表达干细胞相关基因、高成瘤性,是肿瘤干细胞.

关键词：肿瘤干细胞、滑膜肉瘤、CD133、SW982

所属期刊栏目：29

分类号：R738.5(肿瘤学)

资助基金：河南省医学科技攻关计划2018020327

在线出版日期：2021-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：2416-2422