miR-509-5p通过靶向HMGA2调控非小细胞肺癌H1299细胞增殖、迁移和侵袭及其机制探讨

摘要：

目的:探讨miR-509-5p通过靶向HMGA2对非小细胞肺癌H1299细胞增殖、迁移和侵袭的调控作用及其机制.方法:体外培养人正常肺细胞株CCD-19LU和肺腺癌细胞株A549、H1299,采用qRT-PCR检测miR-509-5p的表达;转染miR-509-5p mimics构建miR-509-5p过表达的H1299细胞后,采用MTT和克隆形成实验检测细胞的增殖能力,Transwell小室实验检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot检测TWIST1、β-catenin和AXIN1蛋白的表达.通过生物信息学分析预测HMGA2可能是miR-509-5p的靶点,并采用双荧光素酶报告基因系统和Western blot检测miR-509-5p和HMGA2的靶向关系.转染干扰质粒载体pLL2G-shHMGA2构建HMGA2沉默的H1299细胞,采用MTT实验、克隆形成实验和Transwell小室实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力,Western blot检测TWIST1、β-catenin和AXIN1蛋白的表达.结果:与CCD-19LU细胞相比,A549和H1299细胞中miR-509-5p表达明显降低(P<0.05),且在H1299细胞中低于在A549细胞中的表达(P<0.05).与miR-NC组相比,miR-509-5p组细胞的增殖、迁移和侵袭能力均明显减弱(P<0.05),TWIST1和 β-catenin蛋白的表达明显降低(P<0.05),而AXIN1蛋白的表达明显升高(P<0.05);野生型miR-509-5p组细胞的荧光素酶活性明显低于miR-NC组(P<0.05),而野生型anti-miR-509-5p组细胞的荧光素酶活性明显明显高于anti-miR-NC组(P<0.05);miR-509-5p过表达可抑制HMGA2表达,反之则促进其表达.沉默HMGA2表达后,H1299细胞的变化趋势与miR-509-5p过表达的结果相一致.结论:miR-509-5p可通过靶向HMGA2调控非小细胞肺癌H1299细胞的增殖、迁移和侵袭,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关.

关键词：非小细胞肺癌、miR-509-5p、细胞增殖、迁移、HMGA2

所属期刊栏目：27

分类号：R734.2(肿瘤学)

在线出版日期：2020-07-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：3020-3026