10.3969/j.issn.1672-4992.2017.18.005
ZONAB和E-cadherin在膀胱癌细胞系中的表达及RNA干扰ZONAB表达对癌细胞侵袭力的影响
目的:探讨慢病毒介导ZONAB基因的RNA干扰对膀胱癌侵袭力的影响.方法:用Realtime PCR法分别检测人类尿路上皮永生细胞系sv-huc-1和膀胱尿路上皮癌细胞系UM-UC-3、T24、5637中ZONAB和E-cadherin的mRNA表达水平,用Western blot法分别检测各细胞系中ZONAB蛋白表达水平,设计、合成干扰靶点,构建纯化重组慢病毒,感染人膀胱癌UM-UC-3细胞,根据ZONAB基因的抑制率,筛选最有效的ZONAB基因RNAi靶序列组,验证ZONAB基因的沉默效果,用Transwell侵袭试验检测UM-UC-3细胞体外侵袭力的改变.结果:Realtime PCR法和Western blot法测得UM-UC-3、T24、5637中ZONAB的表达水平高于sv-huc-1,均具有显著性差异(P<0.05);而Realtime PCR法测得UM-UC-3、T24、5637中 E-cadherin的mRNA表达水平低于sv-huc-1(P<0.05).成功构建ZONAB基因RNA干扰慢病毒载体并获得相应的慢病毒,与对照组相比RNA干扰组UM-UC-3细胞ZONAB基因mRNA水平的抑制率为71.4%(P<0.05),蛋白水平抑制率为76.8%,其穿过人工基底膜的平均细胞数为13.1±2.8/HP,明显少于阴性对照组和空白对照组(P<0.05).结论:ZONAB在膀胱癌细胞系中表达上调,慢病毒介导ZONAB基因的RNA干扰能够抑制UM-UC-3细胞侵袭.
ZONAB、膀胱癌、侵袭
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R737.14(肿瘤学)
国家自然科学基金青年基金资助项目81501292;辽宁省自然科学基金优秀人才培育项目2014021052
2017-08-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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