稳定表达人MAGE-1基因小鼠黑色素瘤细胞系的建立

摘要：

目的:构建真核表达载体,并在小鼠黑色素瘤B16细胞中稳定表达.方法:用PCR方法扩增质粒pUC19-MAGE-1中目的基因MAGE-1,连接到真核表达载体pCDNA3.1中,构建真核表达pCDNA3.1-MAGE-1,脂质体法转染小鼠黑色素瘤B16细胞.G418筛选阳性克隆(B16-MAGE-1),用RT-PCR和Western blot检测阳性克隆中mRNA和蛋白质的表达;分别以2×105个B16细胞和B16-MAGE-1接种于C57BL/6小鼠右侧背部皮下,观察B16-MAGE-1细胞的致瘤能力.结果:用PT-PCR与Western bolt分别在B16-MAGE-1细胞中检测到人MAGE-1基因的mNRA和蛋白质的表达,两组共20只小鼠均皮下成瘤,且肿瘤大小没有明显差异.结论:成功构建了真核表达载体pCDNA3.1-MAGE-1,获得了稳定表达人MAGE-1基因的小鼠黑色素瘤B16细胞系,并保持很好的致瘤能力,为研究MAGE家族在肿瘤免疫治疗中的应用奠定了基础.

关键词：黑色素瘤抗原、基因转染、肿瘤免疫治疗

所属期刊栏目：14

分类号：R730.3(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30271464

在线出版日期：2006-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：1051-1053