10.3969/j.issn.0253-9926.2022.14.006
微小RNA-124-3p调控KIF26B对膀胱尿路上皮癌细胞顺铂耐药性的影响
目的 探讨微小RNA(miR)-124-3p调控KIF26B对膀胱尿路上皮癌细胞的顺铂耐药性的影响.方法 体外培养人膀胱移行细胞癌细胞(T24),使用顺铂(DDP)浓度递增的方法处理建立耐药T24细胞(T24/DDP),分为T24/DDP(NC)组、转染过表达miR-124-3p组(miR-124-3p模拟物)、转染低表达miR-124-3p组(miR-124-3p抑制剂)、共转染过表达miR-124-3p和过表达KIF26B组(miR-124-3p模拟物+oe-KIF26B).采用细胞转染的方式将NC-模拟物、NC-抑制剂、miR-124-3p模拟物、miR-124-3p抑制剂、oe-KIF26B转染至T24/DDP细胞中;采用CCK-8检测细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50);采用蛋白印迹法检测多药耐药蛋白2(MRP2)以及细胞凋亡相关的蛋白;采用实时荧光定量检测miR-124-3p;采用双荧光素酶报告基因系统验证miR-124-3p和KIF26B的靶向关系;采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 与正常T24细胞相比,T24/DDP细胞IC50值升高,细胞凋亡率降低,MRP2、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、Bcl-2、Bcl-XL表达上调,miR-124-3p表达水平降低.与NC-模拟物组相比,miR-124-3p模拟物组miR-124-3p表达水平显著升高,IC50值降低,细胞凋亡率升高,MRP2、XIAP、Bcl-2、Bcl-XL表达下调.KIF26B的表达水平,过表达miR-124-3p抑制KIF26B的表达,低表达miR-124-3p促进KIF26B的表达,共转染miR-124-3p模拟物和oe-KIF26B后明显恢复单独转染miR-124-3p模拟物的作用.结论 miR-124-3p通过调控KIF26B提升膀胱尿路上皮癌细胞对顺铂的敏感性.
膀胱肿瘤、尿道上皮、顺铂、耐药性、微RNAs
51
R737.14;R394.3;R575
2022-10-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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