shRNA介导的Iduna沉默对肺癌A549细胞系细胞周期及其相关蛋白表达的影响
目的：利用shRNA沉默E3泛素连接酶Iduna基因，观察Iduna对非小细胞肺癌细胞系A549细胞周期及其相关蛋白表达的影响。方法采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印迹法筛选Iduna高表达细胞系。构建shRNA-Iduna真核表达载体，瞬时转染A549细胞，蛋白印迹法检测转染效率。流式细胞仪检测细胞周期变化。蛋白印迹法检测细胞周期相关蛋白的表达。结果蛋白印迹法筛选Iduna高表达细胞系显示A549和SPC细胞中Iduna mRNA和蛋白水平高于其他细胞系。shRNA-Iduna转染A549细胞系后，流式细胞仪检测细胞周期显示干扰组G0/G1期比例增加，S期比例相对减少（ P ＜0.05）。蛋白印迹法检测与细胞周期相关的G1/S期调控蛋白[细胞周期蛋白（cyclin）A、cyclin D1、cyclin E、CDK2、CDK4、CDK6、P21、P27、P53等]的表达情况，结果显示干扰组cyclin D1、cyclin E和CDK4蛋白表达减少（ P ＜0.05）。结论 Iduna可能通过调控cyclin D1、cyclin E和CDK4蛋白的表达，使细胞阻滞于G0/G1期，从而调节肺癌细胞周期进程。
癌、非小细胞肺、泛素蛋白连接酶类、细胞周期、细胞周期蛋白类
R73;R3
国家自然科学基金30973502；辽宁省科技厅科学技术计划2012225072
2014-05-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
851-854
