RNF146真核表达载体的构建及其对非小细胞肺癌细胞系生物学行为的影响
目的：构建 E3泛素连接酶环指蛋白146（RNF146）基因真核表达载体，研究 RNF146对非小细胞肺癌细胞系体外生物学行为的影响。方法采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白印迹法筛选 RNF146低表达细胞系。构建 pEX4-RNF146真核表达载体，经酶切和测序后瞬时转染 LTE 细胞，荧光显微镜观察、蛋白印迹法检测转染效率。四甲基偶氮唑盐（MTT）比色实验检测肿瘤细胞体外增殖能力，划痕实验评价肿瘤细胞体外迁移能力，Buyden 小室实验检测肿瘤细胞体外侵袭能力。结果酶切和基因测序证实重组质粒 pEX4构建正确。MTT 比色实验显示转染 pEX4-RNF146组细胞增殖速度明显高于转染空载体组和未转染组（P ＜0.05）。划痕实验显示转染组细胞24 h 迁移率明显高于空载体组和未转染组（P ＜0.05）。Buyden 小室实验结果表明转染组比空载体组和未转染组穿膜数目明显增多（P ＜0.05）。结论RNF146基因转染能促进非小细胞肺癌 LTE 细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力，可能是一个潜在的促肿瘤增殖、侵袭和转移的相关基因。
癌、非小细胞肺、泛素蛋白连接酶类、RNF146、增殖
R39;O6
国家自然科学基金30973502；辽宁省科技厅科学技术计划2012225072
2014-05-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
723-726
