GST-TMPRSS4融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达

摘要：

目的 构建带有谷胱甘肽S-转移酶标签的TMPRSS4载体(GST-TMPRSS4)原核表达载体,并诱导表达.方法 以T7-TMPRSS4真核表达载体为模版,用聚合酶链反应(PCR)方法扩增TMPRSS4编码序列,定向插入pGEX-5X-1载体中.构建原核表达质粒进行酶切鉴定并命名为GST-TMPRSS4.融合载体转化BL-21感受态细菌中,经异丙基硫代β-D 半乳糖苷(IPTG)大量诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹法.结果 成功构建了原核表达质粒GST-TMPRSS4,并用Western blot方法证实了GST-TMPRSS4融合蛋白的表达.结论 成功构建了GST-TMPRSS4 原核表达载体,并证实了融合蛋白表达,为纯化TMPRSS4及研究其结构与功能提供了研究基础.

关键词：质粒、融合蛋白、TMPRSS4

所属期刊栏目：42

分类号：R39;R37

资助基金：国家自然科学基金30871390,30800415

在线出版日期：2013-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：123-125