乙型脑炎病毒C蛋白编码基因重组质粒构建与表达

摘要：

目的 构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)C蛋白编码基因重组子并鉴定.方法 以JEV SA14-14-2株总RNA为模板,应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法扩增JEV C蛋白编码基因,克隆至pMD19-T Simple载体测序.为便于分析JEV C蛋白编码基因重组子在哺乳动物细胞中的表达,在JEV C蛋白编码基因5′端附加FLAG 序列,并亚克隆至pcDNA 3.1(+)载体中,构建重组子pJc并经酶切及DNA测序分析.脂质体法将pJc转染中华仓鼠卵巢(CHO)细胞.免疫荧光检测转染的CHO细胞中JEV C蛋白分布与表达.结果 pJC经BamH I/EcoR I酶切释出的插入子片段(414 bp)分别与预期结果相符合.所编码的融合蛋白主要分布于胞质,少量分布于胞膜.结论 pJC成功构建,转染的CHO细胞可表达JEV C蛋白.

关键词：脑炎病毒、日本、病毒蛋白质类、蛋白质C、CHO细胞

所属期刊栏目：42

分类号：R39;R51

资助基金：国家自然科学基金30471547;辽宁省自然科学基金20042072;辽宁省教育厅基础研究计划项目05L498;辽宁省教育厅高等学校科研项目L2010589

在线出版日期：2013-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：7-9