粒细胞集落刺激因子动员的外周血干细胞悬液诱导培养树突状细胞的研究

摘要：

目的研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的外周血干细胞(PBSC)悬液中单核细胞和造血干/祖细胞分别诱导培养的树突状细胞(DC)的特性,探讨临床应用PBSC悬液诱导DC的前景.方法健康供者经G-CSF动员后采集PBSC,分两种方法诱导培养树突状细胞:①贴壁细胞(单核细胞)经粒-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)+白细胞介素-4(IL-4)培养2周,培养结束前48、24 h分别加入肿瘤坏死因子(TNF-α)、布雷菲德菌素( brefeldin A,BFA );②非贴壁细胞( 含CD34+细胞 ),加入Flt3Ligand(FL)+干细胞因子(SCF)+GM-CSF+IL-4培养1周,再按前一种方法继续培养2周.培养结束后,流式细胞仪分析细胞表型和胞质(c)IL-10+(PE标记)、cIL-12(P40)+(TC标记)细胞.结果新鲜标本含CD14+细胞(18.4±8.6)%,CD34+细胞(0.9±0.4)%.以PBSC悬液中的2×106单个核细胞为起始细胞,前一种培养方法获得(1.6±0.6)×105细胞,细胞表型:CD11c+(97.3±5.2)%,CD86+(88.2±6.8)%,CD83+(59.6±8.4)%,HLA-DR+(96.5±7.1)%,CD1a+(36.6±7.5)%,cIL-12(P40)+(15.9±5.1)%,cIL-10+(1.2±0.4)%;后一种培养方法获得(1.2±0.4)×106细胞,细胞表型:CD11c+(91.4±6.4)%,CD86+(76.8±6.9)%,CD83+(47.3±9.3)%,HLA-DR+(65.3±11.3)%,CD1a+(48.2±5.9)%,cIL-12(P40)+(14.8±4.2)%,cIL-10+(1.4±0.5)%.结论 G-CSF动员的PBSC悬液含有丰富造血干/祖细胞和单核细胞,以适当培养条件对这两种细胞分别诱导,均能够培养出成熟的激活的能够分泌IL-12(P40)的DC;对造血干/祖细胞先行扩增再诱导分化的培养方法能够获得更多的DC.在患者需要大量自身DC用于治疗用途时,G-CSF动员的PBSC悬液是很好的诱导培养DC的材料.

关键词：树突细胞、单核细胞、造血干细胞、免疫治疗

所属期刊栏目：33

分类号：R4(临床医学)

资助基金：广东省深圳市科技计划199806009

在线出版日期：2004-06-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：285-287