microRNA-185-5p真核表达载体构建及其对胰腺癌Panc-1细胞增殖的影响

摘要：

目的:构建microR-185-5p(miR-185-5p)的过表达载体并研究miR-185-5p对人胰腺癌Panc-1细胞体外增殖的影响.方法:将人工合成的miR-185-5p寡聚核苷酸与经EcoR I和HindⅢ双酶切连接上纯化后的真核表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR,接着转化进E.Coli Top10,再经过DNA测序、比对检测进行验证;将构建成功的载体转染进Panc-1细胞中,用倒置荧光显微镜和qRT-PCR方法验证转染效率,用CCK8方法检测miR-185-5p对Panc-1细胞增殖的影响.结果:成功构建了miR-185-5p真核表达载体;构建好的载体瞬时转染Panc-1细胞后发现miR-185-5p的表达显著增加,并且能够抑制Panc-1细胞的体外增殖能力.结论:miR-185-5p的真核表达载体构建成功,同时证明了miR-185-5p过表达可抑制人胰腺癌细胞Panc-1的增殖.

关键词：miR-185-5p;真核表达载体;胰腺癌;双酶切;Panc-1细胞;细胞增殖

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分类号：R735.9(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81660492

在线出版日期：2021-11-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1323-1326,1332