核酸质谱技术对辐射相关基因单核苷酸多态性多重检测方法的构建及验证

摘要：

目的 构建可同时检测多个辐射相关基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的高通量、高分辨率、快速的方法.方法 选取 2020 年 4～6 月火箭军特色医学中心 75 例年满 18 周岁的健康男性为研究对象,采集外周血并提取DNA.文献筛选辐射相关17种基因28个SNP,设计多重PCR引物和单碱基延伸引物,通过PCR扩增和延伸,应用DP-TOF型飞行时间质谱检测系统对SNP位点进行基因分型,并对其中7份样本用Sanger测序法进行验证.结果 构建的28个SNP均分型成功.75份DNA样本28个SNP的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(martix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)检测结果显示基因分型检出率为 100.0%.7 份DNA样本 28 个SNP的基因型与Sanger测序结果完全符合,其准确度为 100.0%.结论 成功构建可同时检测 17种基因28个辐射相关SNP的核酸质谱检测技术平台,该方法具有高通量、快速准确的优点.

关键词：电离辐射、单核苷酸多态性、核酸质谱技术

所属期刊栏目：38

分类号：Q503(一般性问题)

资助基金：军队后勤面上项目;中心创新课题

在线出版日期：2023-10-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：5-11