LncRNA UCA1介导Raf/MEK/ERK信号通路调控乳腺癌细胞生物学作用的机制研究

摘要：

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)尿路上皮癌胚抗原1(urothelial carcinoma antigen 1,UCA1)在乳腺癌细胞中的表达及其对乳腺癌细胞生物学作用的机制研究.方法 实时定量聚合酶链式反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)法检测LncRNA UCA1在正常人乳腺上皮细胞MCF-10A与乳腺癌细胞BT-474,MCF-7,SKBR-3和MDA-MB453中的表达;选择BT-474和MCF-7细胞随机分为三组,分别转染UCA1-siR,NC-siR及Control,再通过qRT-PCR法验证转染后BT-474和MCF-7细胞中LncRNA UCA1表达;通过CCK-8法、Transwell实验和流式细胞仪检测BT-474和MCF-7细胞增殖、侵袭、凋亡能力;利用Western blot检测两种细胞中RAF/MEK/ERK通路相关蛋白的表达.结果 与MCF-10A相比,LncRNA UCA1在BT-474,MCF-7,SKBR-3和MDA-MB453细胞中表达水平分别上调了133.8％,169.2％,35.4％和73.8％,差异有统计学意义(F=34.152,P=0.002).转染处理后,BT-474细胞Control组、NC-siR组和UCA1-siR组Lnc RNA UCA1表达量分别为1.52±0.36,1.49±0.17和0.63±0.11,差异有统计学意义(F=42.628,P<0.001).MCF-7细胞Control组、NC-siR组和UCA1-siR组Lnc RNA UCA1表达量分别为1.75±0.25,1.70±0.22和0.74±0.08,差异亦有统计学意义(F=39.372,P<0.001).CKK-8结果表明,与Control组和NC-siR组相比,UCA1-siR组BT-474和MCF-7细胞增殖能力均显著下降,差异有统计学意义(F=57.382～198.251,均P<0.001).Transwell结果显示,BT-474细胞Control组、NC-siR组和UCA1-siR组穿膜数分别为205±12个,192±16个和114±9个,差异有统计学意义(F=108.250,P<0.001),MCF-7细胞Control组、NC-siR组和UCA1-siR组穿膜数分别为187±9个,175±13个和96±12个,差异亦有统计学意义(F=139.062,P<0.001).流式结果显示,BT-474细胞Control组、NC-siR组和UCA1-siR组凋亡率分别为4.25％,4.44％和10.28％,差异有统计学意义(F=49.134,P<0.001),MCF-7细胞Control组、NC-siR组和UCA1-siR组凋亡率分别为2.30％,3.05％和8.98％,差异亦有统计学意义(F=62.750,P<0.001).Western blot结果显示,与Control组和NC-siR组相比,UCA1-siR组BT-474和MCF-7细胞中Raf,p-MEK/MEK及p-ERK1/2/ERK1/2蛋白表达均显著下调,差异有统计学意义(F=42.384～76.092,均P<0.001).结论 LncRNA UCA1在乳腺癌细胞系中呈高表达,沉默LncRNA UCA1基因可以抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭,促进凋亡,其作用机制可能与阻断Raf/MEK/ERK磷酸化通路有关.

关键词：乳腺癌细胞、长链非编码RNA尿路上皮癌胚抗原1、生物学作用、Raf/MEK/ERK通路

所属期刊栏目：37

分类号：R737.9;R730.43(肿瘤学)

在线出版日期：2022-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：40-45