新型冠状病毒肺炎(COVID-19)热灭活咽拭子及热灭活后提取核酸样本在4℃保存的稳定性研究

摘要：

目的 研究56℃30 min热灭活后的新型冠状病毒肺炎(COVID-19)咽拭子及提取的核酸在4℃保存的稳定性.方法 采用多重荧光定量PCR方法对一例COVID-19患者的咽拭子样本,56℃30 min热灭活后进行COVID-19双靶点(ORF1ab和N基因)核酸检测,把原始咽拭子样本及提取的核酸保存在4℃,分别于24,48,72和96h再次检测咽拭子样本及提取核酸中新冠病毒核酸的含量(Ct值),分析热灭活后咽拭子样本及提取核酸在4℃保存的稳定性.结果 COVID-19患者的咽拭子样本,56℃30 min热灭活后核酸检测结果为ORF1ab和N基因双阳性,Ct值分别为31.27和30.64,咽拭子样本4℃保存24,48,72和96h后再次检测ORF1ab和N基因的结果为24h(31.41和30.68),48h(34.13和34.28),72h(34.06和34.11)和96h(36.22和40.02).提取的核酸4℃保存24,48,72和96h后的检测结果为24h(31.64和30.06),48h(31.62和29.95),72h(31.72和29.75)和96h(31.36和30.09).56℃30 min热灭活的咽拭子样本在4℃保存24h后,对COVID-19核酸的检测无明显影响(偏倚<1％),但4℃保存48～72h,ORF1ab基因核酸降解约7倍,N基因降解约11倍,4℃保存96h,ORF1ab和N基因核酸分别降解30.91倍和666.29倍.但是提取的核酸4℃保存24～96h后,对核酸的检测结果无明显影响(偏倚均小于3％).结论 研究结果表明56℃30 min热灭活后提取的核酸的稳定性比原始咽拭子样本好,热灭活后的咽拭子样本可在4℃保存24h.

关键词：新型冠状病毒肺炎、热灭活、咽拭子样本、提取核酸、4℃保存

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分类号：R373.19;R446.5(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：深圳市三名工程项目SZSM201812088

在线出版日期：2020-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：132-134