PLA2R真核表达细胞株的构建及其在膜性肾病诊断中的应用

摘要：

目的 构建表达磷脂酶A2受体(phospholipase A2 receptor,PLA2R)的稳定细胞株并对其在膜性肾病(membranous nephropathy,MN)诊断中的应用进行初步评价.方法 人工合成pIRES-PLA2R真核表达质粒并稳定转染CHO细胞,筛选后分别进行RT-PCR,Western免疫印迹和细胞免疫荧光方法(immunofluorescence assay,IFA法)鉴定.以构建的稳定细胞株建立PLA2R自身抗体IFA法并对2018～2019年收集的97例肾病患者血清样本进行初步检测.结果 成功构建表达PLA2R蛋白的稳定细胞株CHO-PLA2R并以该细胞株为基础建立PLA2R自身抗体IFA法.与ELISA试剂盒检测结果相比,阴性样本符合率为100％(55/55);阳性样本符合率为76.2％(32/42);总体符合率为89.7％(87/97).Kappa检验具有一定的一致性(P<0.05).结论 成功构建表达PLA2R蛋白的稳定细胞株,并应用该细胞株建立了检测PLA2R自身抗体的IFA检测方法.

关键词：膜性肾病、磷脂酶A2受体、细胞株、质粒、免疫荧光方法

所属期刊栏目：35

分类号：R692;R392.12(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)

资助基金：河北省卫生计生委;河北省2015年度医学科学研究重点课题计划

在线出版日期：2020-09-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-5,13