miR-25靶向作用FBXO33在肾透明细胞癌凋亡及预后的相关实验研究

摘要：

目的：探索miR-25与 FBXO33在肾透明细胞癌（renal cell carcinoma，RCC）中的相关性，并分析其与肾癌细胞凋亡及预后的关系。方法从肿瘤基因图谱（the cancer genome atlas，TCGA）数据库中获取1998～2013年511例RCC芯片数据，Pearson检验分析miR-25和 FBXO33表达的相关性；检测miR-25对构建的 FBXO333’UTR野生型、突变型及空白对照荧光素酶报告基因中荧光素表达的影响；CCK8法检测瞬转 miR-25 mimic，siRNA及对照序列对 RCC细胞活力的影响；流式细胞术检测瞬转 miR-25 mimic，siRNA及对照序列对 RCC细胞凋亡的影响；TCGA数据库中筛选出 miR-25与FBXO33表达负相关且具有随访的58例患者，分为miR-25低表达联合 FBXO33高表达组（n＝34）和 miR-25高表达联合FBXO33低表达组（n＝24）进行生存分析，采用 Log-rank 检验和 Gehan-Breslow-Wilcoxon 检验。结果 RCC 组织中FBXO33与miR-25表达负相关（r＝－0.1611，Pearson 检验）。与空白对照组相比，miR-25可降低野生型组 RLU 至80.2％±2.6％，差异具有统计学意义（t＝6.539，P＝0.006）；而突变序列组 RLU为空白对照组的103.5％±8.4％，差异不具有统计学意义（t＝0.0413，P＝0.9684）。72 h细胞活力与空白对照组相比，miR-2 siRNA组提高32.7％±3.5％，差异具有统计学意义（P＜0.05）；而miR-25 mimic组降低23.3％±1.7％，差异具有统计学意义（P＜0.05）。mimic-miR-25-3p与其对照组比较，早期凋亡率降低（8.83±0.09 vs 12.83±0.14），差异具有统计学意义（t＝42.17，P＝0.005）；晚期凋亡率轻度升高（0.41±0.10 vs 0.33±0.15），差异无统计学意义（t＝0.75，P＝0.639）；siRNA-miR-25-3p与其对照组比较，早期凋亡率升高（19.05±1.64 vs 13.68±0.78），差异具有统计学意义（t＝5.12，P＝0.006）；晚期凋亡率轻度降低（0.56±0.10 vs 0.62±0.08），差异无统计学意义（t＝0.83，P＝0.376）。miR-25低表达同时 FBXO33高表达患者（n＝34）与 miR-25高表达而 FBXO33低表达者（n＝24）相比生存率更高，差异具有统计学意义（采用 Log-rank检验P＝0.0252，采用 Ge-han-Breslow-Wilcoxon检验P＝0.0049）。结论 miR-25可抑制肾癌 FBXO33，提高细胞活性，抑制凋亡而降低患者预后。

关键词：miR-2 5、FBXO3 3、肾透明细胞癌、细胞凋亡、预后

所属期刊栏目：32

分类号：R737.11;R730.43(肿瘤学)

资助基金：陕西省教育厅科学研究项目12JK0699；陕西省科学技术研究发展计划2011JM4038。

在线出版日期：2017-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：38-40,44