乙型肝炎病毒SYBR Green I实时荧光定量PCR方法的建立及临床应用

摘要：

目的建立 SYBR Green I实时荧光定量 PCR检测乙型肝炎病毒 DNA的快速方法，并探讨其临床应用价值。方法根据GenBank公布的Hepatitis B virus gp1基因序列设计引物，建立SYBR Green I实时荧光定量PCR，并对反应体系和扩增程序进行优化。定量标准品通过基因克隆方法获得，同时以浙江省夸克公司 HBV DNA定量检测试剂盒作对照，应用于随机选取的100份乙型肝炎患者血清检测。结果 SYBR Green I 实时荧光定量 PCR 检出限范围为5×102 copies／ml～5×108 copies／ml，HBV DNA浓度与CT值有良好线性关系，无交叉反应，整个过程仅需2.5 h。在随机抽取的100份临床标本应用中，与浙江省夸克公司的 HBV荧光定量 PCR检测试剂相比，建立的 SYBR Green I实时荧光定量PCR体系灵敏度100％，特异度92.5％。结论 SYBR Green实时荧光定量PCR快速、简便、灵敏度高、特异度强，可用于乙型肝炎患者病情监测，有效指导临床用药，准确评价 HBV感染者的病情。

关键词：SYBR Green I实时荧光定量PCR、乙型肝炎病毒DNA、快速检测、公司产品对比

所属期刊栏目：31

分类号：R512.62;Q503(传染病)

资助基金：深圳市宝安区科技计划项目2014183。

在线出版日期：2016-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：98-101