10.3969/j.issn.1671-7414.2015.02.026
血清凝集、基因测序联合检测群霍乱弧菌的应用
目的:避免霍乱弧菌检测假阳性,提高检测正确率。方法随机选取2013年1~7月,全国各省市 CDC 送往中国CDC 霍乱初筛阳性菌株14株;用 LB 营养琼脂培养12 h,挑取单菌落进行霍乱弧菌血清凝集,同时水煮模板法提取菌株的DNA。针对弧菌属16SrDNA 序列设计引物,进行弧菌16SrDNA PCR 检测,电泳观察16SrDNA 产物,将16SrDNA 阳性产物送测序公司测序,测序结果在 NCBI 网站上进行 Blast 比对,分析比较血清凝集和 Blast 比对结果。结果共选取14株菌进行实验,血清凝集阳性12株,2株未凝。经弧菌16SrDNA 扩增,电泳观察14株菌均扩增出相应的片段,说明所选菌株均为弧菌属。将14株菌的16SrDNA 阳性产物测序,并将测序结果进行 Blast 比对:2株血清未凝集菌均是哈维氏弧菌;12株血清凝集阳性的菌中,1株是需钠弧菌,其余11株是霍乱弧菌。结论血清凝集和基因测序联合检测群霍乱弧菌,可避免霍乱弧菌检测假阳性,提高检测正确率。
霍乱弧菌、血清凝集、16SrDNA、基因测序
R378.3;Q786(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2015-05-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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