10.3969/j.issn.1671-7414.2014.05.021
实时荧光定量PCR检测人粪便中空肠弯曲杆菌方法的建立与评价
目的:建立一种快速检测人粪便样本中空肠弯曲杆菌的实时荧光定量 PCR方法。方法根据空肠弯曲杆菌保守序列设计特异引物,建立空肠弯曲杆菌的实时荧光定量 PCR检测法。对该方法的线性范围、抗干扰能力进行考察。同时采用培养法和实时荧光定量 PCR法对150例粪便样本进行检测,以培养法检测结果作为参照标准,对实时荧光定量 PCR方法的灵敏度、特异度、准确度和重复性进行考察。采用 Kappa检验对两种检测方法的结果进行统计学分析。结果建立的实时荧光定量PCR方法标准曲线线性关系良好Y=-3.51 Log(X)+37.09,相关系数为0.996,理论检测下限为102 CFU/ml。抗干扰能力强,仅空肠弯曲杆菌出现特异性扩增曲线。与培养法相比,其灵敏度、特异度、准确度分别为92.4%,95.8%和94%;检测结果重复性良好(CV%<5%)。统计学分析显示两种方法检测结果具有一致性,且一致性强度为极强(Kappa=0.88,P<0.05)。结论实时荧光定量PCR法能准确快速检测粪便样品中的空肠弯曲杆菌。
实时荧光定量PCR、空肠弯曲杆菌、人粪便
R378.3;Q503(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
黄石市医疗卫生科技攻关计划项目2012A070-19。
2014-11-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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