10.3969/j.issn.1671-7414.2014.05.013
肺炎链球菌TaqMan实时荧光定量PCR的建立及临床应用
目的:建立TaqMan实时荧光定量PCR检测肺炎链球菌的方法,应用于临床儿童社区获得性肺炎(CAP)标本的快速筛查。方法根据 GenBank公布的肺炎链球菌自溶酶基因(lytA)设计引物和探针,建立实时荧光定量 PCR,并对体系进行优化;同时以痰培养法做双盲对照,应用于1504份 CAP患儿标本检测。结果 TaqMan实时荧光定量 PCR菌液的最低检出限可达18.75 cfu/PCR,无交叉反应,特异度好;对1504份儿童CAP标本检测,141份肺炎链球菌实时荧光定量PCR阳性,其中140份肺炎链球菌痰培养阳性,该方法灵敏度为100%,特异度为99.93%。从样品处理到结果报告仅需2.5 h。结论 TaqMan实时荧光定量PCR快速、简便、灵敏度高、特异度强,可用于儿童CAP中肺炎链球菌的初筛和指导抗生素的的合理使用。
TaqMan实时荧光定量PCR、儿童社区获得性肺炎、肺炎链球菌、快速检测
R378.12;Q503(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
深圳市宝安区科技计划项目2014184。
2014-11-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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