核酸吸附快速分离法与国外同类试剂盒及传统方法的比较与评估

摘要：

目的 评价核酸吸附材料及配套系列核酸分离试剂,与国外同类试剂盒及传统方法提取核酸结果的比较,探讨其替代国外同类产品的可行性.方法 将核酸吸附法、传统法及国外三种试剂盒分为5组(A,B,C,D,E)进行比较,每组分别从细胞、细菌、血液、植物中提取DNA和RNA,采用紫外分光光度法检测浓度,以吸光度A值检测样品纯度,凝胶电泳法检测核酸完整性.结果 DNA含量:A组14.073±0.033 μg/ml,B组4.31±0.041 μg/ml,C组14.325±0.030 μg/ml,D组13.876±0.023 μg/ml,E组12.654±0.012 μg/ml,A组与B组相比差异有统计学意义(t=11.175,P＜0.05),与其他各组相比差异无统计学意义(t=0.014,P=0.989;t=-0.525,P=0.627;t=0.453,P=0.674).RNA含量:A组287.740±0.036 μg/ml,B组32.121±0.055 μg/ml,C组285.12±0.027 μg/ml,D组276.10±0.034 μg/ml,E组264.36±0.071 μg/ml,A组与B组相比差异有统计学意义(t=29.284,P＜0.05),与其他各组相比差异无统计学意义(t=-0.22,P=0.836;t=-0.825,P=0.456;t=0.474,P=0.66).DNA纯度;A组1.828±0.016,B组1.201±0.013,C组1.836±0.022,D组1.819±0.014,E组1.796±0.025,A组与B组相比差异有统计学意义(t=7.448,P＜0.05),与其他各组相比差异无统计学意义(t=-0.099,P=0.926;t=0.111,P=0.917;t=-0.833,P=0.452).RNA纯度:A组1.952±0.021,B组1.331±0.017,C组1.950±0.018,D组1.947±0.026,E组1.879±0.034,A组B组相比差异有统计学意义(t=8.755,P＜0.05),与其他各组相比差异无统计学意义(t=0.024,P=0.982;t=0.061,P=0.954;t=1.434,P=0.225).A组和C,D,E组提取的核酸无降解,完整性好.B组核酸出现降解现象,完整性差.结论 核酸吸附分离法较传统法简单快速,提取的核酸纯度高、产量高,不使用酚-氯仿有机溶剂,与国外同类试剂盒效果相当,为替代国外同类产品及实现技术原始创新奠定了实验基础.

关键词：DNA、RNA、吸附分离、试剂盒、实验评估

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分类号：R392-33

资助基金：国家发明专利项目专利号:201220218147.4,201210334908.7发明人:饶国洲

在线出版日期：2014-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：94-97