基因组DNA快速提取方法的探讨与应用

摘要：

目的 探讨以硫氰酸胍作为组织细胞裂解液的可行性,并建立基因组DNA快速提取方法.方法 利用硫氰酸胍等作为裂解消化液,分别从组织、细胞和全血中提取基因组DNA.采用紫外分光光度仪检测基因组DNA含量及纯度,琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA的完整性,以提取的基因组DNA作为模板进行PCR扩增GAPDH基因,并用该方法检测凋亡细胞DNA ladder.结果 基因组DNA提取时间短(耗时30～50 min),基因组DNA含量85 μg/mg(组织),52 μg/1×107细胞,27 μg/ml(血液).A260 nm/A280 nm比值在1.8～1.9之间,电泳显示基因组DNA完整性好,无蛋白质和RNA污染,基因组DNA长度大于48 kb.PCR扩增出306 bp GAPDH目的 基因,肿瘤细胞经抗癌基因诱导凋亡后琼脂糖凝胶电泳可见180～200 bp典型的凋亡带.结论 硫氰酸胍可作为基因组DNA提取裂解消化液,该方法具有简便、快捷、稳定性好等特点.

关键词：组织、细胞、基因组DNA、硫氰酸胍、方法

所属期刊栏目：24

分类号：Q781(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2010-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：52-54