人源抗幽门螺杆菌黏附素HpaA噬菌体单链抗体库的构建和筛选

摘要：

目的 构建人源噬菌体单链抗体库, 筛选抗幽门螺杆菌(Hp)黏附素HpaA特异性抗体.方法 首先检测献血员抗Hp和rHpaA抗体,分离阳性者外周血淋巴细胞,提取总RNA并等量混合.利用RT-PCR 扩增全套重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因, 采用overlap方法连接,插入噬菌体载体pComb3x构建噬菌体单链抗体库,以纯化rHpaA为靶标筛选特异性抗体.结果 成功获得VH和VL基因,分子量分别约为400bp和350bp.将VH 和VL纯化后采用overlap方法连接,插入噬菌体载体pComb3x构建成库容量为3.9×108的单链抗体噬菌体库.以纯化rHpaA为靶标筛选获得与HpaA发生反应最强的克隆ScFv2,通过免疫印迹的方法证明,ScFv2仅与HpaA和Hp菌株反应,不与非Hp菌株反应.结论 人源抗Hp噬菌体抗体库的建立为重组人抗Hp sIgA分子的构建表达奠定了基础.

关键词：噬菌体抗体库、单链抗体、幽门螺杆菌、黏附素

所属期刊栏目：24

分类号：R378.2;Q781(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2009-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：42-45