实时荧光半定量MSP检测肺癌组织CDH1甲基化水平实验条件的探讨

摘要：

目的 探讨实时荧光半定量MSP检测肺癌组织中CDH1 DNA甲基化水平的最适实验条件.方法 通过改变实时荧光半定量MSP反应条件,探讨MSP反应体系最适浓度和反应条件.结果 检测CDH1 DNfA甲基化实时荧光半定量MSP反应体系为dATP,dCTP和dGTP 200 μmol/L,dUTP 400 μmol/L,MgCl23.0 mmol/L,引物600 nmol/L,热启动TaqDNA聚合酶0.04 U/μl,模板3μl,DMSO 2.5%,1×SYBGREEN I染料.1×反应缓冲液,总体系25μl.反应条件为95℃预变性12 min,95℃15 s、退火温度1 min(其中62℃2个循环、60℃3个循环和58℃45个循环)、69℃10 S,循环次数50.结论 改进和建立了CDH1 DNA甲基化水平的相对定量检测方法.

关键词：实时荧光半定量MSP、I型钙黏蛋白基因、肺癌、甲基化

所属期刊栏目：23

分类号：R734.2;R730.45(肿瘤学)

资助基金：昆明医学院第一附属医院科技基金资助项目2005yn05

在线出版日期：2009-02-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：20-23