PCR-SSCP快速检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因的研究

摘要：

目的 探讨PCR-SSCP技术检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因作为新的分子药敏试验方法的价值.方法 应用PCR-SSCP技术检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因核心区的突变,同时对片段长度为215bp的PCR扩增产物进行测序分析.受试菌为23株利福平敏感结核分枝杆菌以及35株利福平抗性结核分枝杆菌.结果 23株利福平敏感结核分枝杆菌分别用PCR-SSCP和PCR扩增片段测序均没有检测到rpoB碱基突变.而在35株利福平抗性菌株中,PCR-SSCP检测到31株与H37Rv标准株不同的带谱,PCR-SSCP检测基因突变的敏感度和特异度分别为88.6%(31/35)和100%(23/23).对35株利福平抗性菌株PCR扩增产物进行测序分析,在其中32株中检出了基因突变.测序分析检测基因突变的敏感度和特异度分别为91.4%(32/35)和100%(23/23).卡方检验,PCR-SSCP和PCR扩增片段测序两种方法的敏感度之间没有显著性差异(P＞0.05).若以DNA测序为标准,则PCR-SSCP检测基因突变的准确度、敏感度和特异度分别为93.1%(54/58),96.9%(31/32)和100%(23/23).结论 PCR-SSCP检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因突变可用于利福平药物敏感度的快速测定.

关键词：聚合酶链反应-单链构象多态性、ropB基因、药物耐受性、结核分枝杆菌

所属期刊栏目：23

分类号：Q781;R378.911(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2008-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：18-20