人心肌肌钙蛋白Ⅰ基因的原核表达及抗体制备

摘要：

目的 进行人心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)基因原核表达裁体的构建,获得高纯度的心肌肌钙蛋白I并制备相应的多克隆抗体.方法 利用RT-PCR方法从人心肌细胞的总RNA中克隆出编码人心肌肌钙蛋白I的cDNA片段,将其插入原核表达载体形成重组体并导入宿主菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达出带6个组氨酸标签的融合蛋白,Ni-NTA树脂纯化,纯化后的融合蛋白免疫小鼠,制备抗血清.通过ELISA,Western blot鉴定血清效价和特异性.结果 成功构建了cTnI的原核表达载体,并在大肠埃希菌中获得了高效表达.Western blot检测证实获得了抗cTnI抗体.结论 成功表达了cTnI蛋白并制备了其特异性抗体.

关键词：人心肌肌钙蛋白I、表达、多克隆抗体

所属期刊栏目：23

分类号：Q786;R392-33(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2008-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：15-17