实时荧光定量RT-PCR法检测TNF-αmRNA基因表达

摘要：

目的 建立实时荧光定量反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测TNF-α基因mRNA表达.方法 用T-A克隆技术构建含TNF基因的载体作为标准模板,采用荧光Taqman方法及探针标记技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,制备标准曲线,检测肿瘤患者与正常人外周血单个核细胞的TNF-α mRNA表达水平变化,并与半定量RT-PCR检测结果进行比较.结果 实时荧光定量RT-PCR检测肿瘤患者外周血单个核细胞TNF-αmRNA表达明显高于正常人,且半定量RT-PCR结果显示TNF-α出现类似的变化趋势.结论 所建立的实时荧光定量RT-PCR用于检测TNF-α mRNA表达,结果用拷贝数表示,比半定量RT-PCR更灵敏、准确.

关键词：实时荧光定量、反转录聚合酶链反应、TNF-α基因

所属期刊栏目：21

分类号：Q503;Q786(一般性问题)

在线出版日期：2006-09-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：13-15