高纯化RNA分离方法的建立与应用

摘要：

目的建立一种从不同生物体来源的组织材料中进行简单、快速、高纯化分离RNA的方法.方法利用胍盐裂解并抑制RNA的降解,用特异的RNA吸附剂吸附;通过清洗液的清洗和洗脱液洗脱,获得高纯化RNA.并用该方法在HL-60细胞中分离总RNA,进行RT-PCR扩增Human TFR(Transferrin Receptor)基因.结果RNA总得率大于80%;纯度高(A260/2801.9～2.0);产量稳定(平均10～15 μg/1×106细胞,1～5μg/mg组织,2.5～5μg/ml全血,50～100 μg/1×109细菌,10～20μg/1×108酵母菌);时间短(20～45 min),无基因组DNA污染,RNA降解少,完整性较好.Human TFR RT-PCR扩增电泳结果显示出1.0kbp,2.0kbp,4.4kbp的DNA片段.结论该方法操作简便、快速,适应于普通实验室对RNA的分析研究工作.

关键词：RNA、纯化分离、方法

所属期刊栏目：20

分类号：Q503(一般性问题)

在线出版日期：2005-12-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：4-6