脱氢姜酮通过调控miR-223-3p抑制喉癌细胞Hep-2增殖、迁移及血管形成

摘要：

目的 探讨脱氢姜酮(DZG)对喉癌细胞Hep-2 增殖、迁移及血管形成的影响及其相关机制.方法 分别以不同浓度的DZG(0,75,150,300 μmol/L)处理Hep-2 细胞24 h,MTT法、Transwell、Western blot法、实时荧光定量PCR(RT-PCR)分别检测Hep-2 细胞的存活率、迁移能力、迁移蛋白波形蛋白(Vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和血管形成蛋白血管内皮生长因子(VEGF)以及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)相对表达水平和miR-223-3p mRNA相对表达量.将Hep-2 细胞分别分为:①空白对照组(control组)、模拟物阴性对照组(miR-NC)、miR-223-3p组(转染miR-223-3p);②空白对照组(si-control组)、阴性对照组(si-NC)及miR-223-3p小干涉RNA组(si-miR-223-3p).MTT法检测细胞增殖抑制能力,Transwell检测细胞迁移能力,Western blot检测细胞VGEF、MMP-2、Vimentin、N-cadherin蛋白相对表达量.结果 0,75,150,300 μmol/L的DZG培养Hep-2 细胞,MTT结果显示,24 h细胞存活率随DZG浓度增加而下降(P＜0.05);Transwell结果显示,细胞迁移能力随DZG浓度增加而下降(P＜0.05);Western blot结果显示,VGEF、MMP-2、Vimentin、N-cadherin蛋白相对表达量随DZG浓度增加而降低(P＜0.05);RT-PCR结果显示,miR-223-3p mRNA相对表达量随DZG浓度增加而增加(P＜0.05).将Hep-2 细胞进行转染后,RT-PCR结果表明,miR-223-3p组Hep-2 细胞miR-223-3p相对表达量较miR-NC组和control组明显升高,si-miR-223-3p组Hep-2 细胞miR-223-3p相对表达量较si-NC组和si-control组明显降低(P＜0.05).MTT法结果显示,miR-223-3p组细胞存活率较miR-NC组明显降低(P＜0.05).不加DZG单独使用正常培养基培养验证miR-223-3p对Hep-2 细胞存活率时发现,miR-223-3p组细胞存活率较miR-NC组和control组细胞明显下降,si-miR-223-3p组细胞存活率较si-NC组和si-control组明显升高(P＜0.05);Transwell结果显示,miR-223-3p组细胞迁移率较miR-NC组和control组明显降低,si-miR-223-3p组细胞迁移率较si-NC组和si-control组明显升高(P＜0.05).Western blot结果显示,miR-223-3p组VGEF、MMP-2、Vimentin和N-cadherin蛋白相对表达量较miR-NC组和control组明显降低,si-miR-223-3p组VGEF、MMP-2、Vimentin和N-cadherin蛋白相对表达量较si-NC组和si-control组明显升高(P＜0.05).结论 DZG可通过调控miR-223-3p抑制喉癌细胞Hep-2 增殖、迁移及血管形成,其机制可能与下调迁移及血管形成相关蛋白VGEF、MMP-2、Vimentin和N-cadherin相关.

关键词：喉癌、miR-223-3p、增殖、侵袭、迁移、血管形成

所属期刊栏目：54

分类号：R739.65(肿瘤学)

资助基金：安徽省高校自然科学研究重点项目;蚌埠医学院自然科学重点项目

在线出版日期：2023-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：446-453