肿瘤相关成纤维细胞外泌体miR-489靶向Twist1对胃癌细胞迁移、侵袭及上皮间质转化的影响

摘要：

目的 探讨肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)外泌体微小RNA-489(miR-489)靶向Twist1对胃癌细胞迁移、侵袭及上皮间质转化(EMT)的影响.方法 体外培养胃癌MGC-803细胞和CAFs细胞.CAFs细胞分为正常对照组(不转染)、mimic NC组(转染negative control-miR-489)和miR-489 mimic组(转染hsa-miR-489 mimic),收集各组CAFs细胞外泌体.MGC-803细胞分为对照组、阴性对照组和miR-489组,分别加入各组CAFs细胞外泌体.双荧光素酶报告基因实验验证miR-489与Twist1的靶向关系;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-489、Twist1 mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组MGC-803细胞中Twist1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Fibronectin蛋白表达情况;Transwell法检测各组MGC-803细胞迁移、侵袭情况.结果 miR-489与Twist1基因存在靶向结合位点且在CAFs细胞中存在靶向关系.与正常对照组和mimic NC组相比,miR-489 mimic组CAFs细胞外泌体中miR-489水平显著升高(P<0.05),Twist1 mRNA及蛋白水平显著降低(P<0.05).与对照组和阴性对照组相比,miR-489组MGC-803细胞迁移、侵袭细胞数及细胞中N-cadherin、Vimentin、Fibronectin蛋白水平显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05).结论 CAFs外泌体miR-489通过靶向抑制Twist1表达,对胃癌细胞MGC-803的迁移、侵袭及EMT过程具有抑制作用.

关键词：肿瘤相关成纤维细胞、外泌体、微小RNA-489、Twist1、胃癌、迁移、侵袭、上皮间质转化

所属期刊栏目：52

分类号：R735.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目;南京医科大学教育基金课题

在线出版日期：2021-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-6