脂联素对低氧条件下大鼠肺微动脉内皮细胞NO生成的促进作用及其机制

摘要：

目的 重组人球状脂联素(APN)促进低氧条件下大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)NO的生成,探讨其潜在的分子机制研究. 方法 原代培养SD大鼠PMVECs,传至第3代经免疫组化法鉴定细胞传至第3代鉴定细胞;PMVECs分4组,常氧组(210 ml/L O2,37 ℃);低氧组(20 ml/L O2);低氧+APN组(20 ml/L O2+ APN 1 μg/ml),低氧+APN+ L-NAME组(20 ml/LO2,+APN lμg/ml+ L-NAME l μg/ml)处理,各组细胞同时处理(加药)后,培养12 h收集上清,硝酸还原法测NO浓度,RT-PCR测定eNOS mRNA的基因表达Western blot检测AMPK/p-AMPK、PI3K/p-PI3K、Akt/p-Akt、eNOS/p-eNOS蛋白表达. 结果鉴定细胞为PMVECs.与常氧组比较,低氧组NO浓度、eNOS mRNA表达水平显著下降(P＜0.01);与低氧组比较,低氧+ APN组低氧诱导的NO浓度、eNOS mRNA表达水平显著增加(P＜0.01);L-NAME可阻断NO的产生和eNOS mRNA的表达.各组AMPK、PI3K、Akt、eNOS总蛋白表达量无差异;与常氧组比较,低氧组中AMPK、PI3K、Akt、eNOS磷酸化表达水平下降(P＜0.05);与低氧组比较,低氧+ APN组AMPK、PI3K、Akt、eNOS磷酸化表达水平增加(P＜0.05);与低氧+APN组比较,低氧+ APN+ L-NAME组AMPK、PI3K、Akt磷酸化表达水平没有变化(P＞0.05);L-NAME可阻断eNOS磷酸化的表达(P＜0.01). 结论低氧条件下APN可促进PMVECs生成NO,其可能机制是AMPK/PI3 K/Akt/eNOS/NO信号通路的激活.

关键词：脂联素、肺微动脉内皮细胞、信号通路、一氧化氮

所属期刊栏目：48

分类号：R544.1(心脏、血管（循环系）疾病)

资助基金：国家自然基金资助项目81270330,30700345,31371151,31271219;陕西省科技厅国际合作课题资助项目2013KW30-02;陕西省科学技术研究发展计划资助项目2013Kkjxx-89

在线出版日期：2017-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：415-419