超低温冻藏牛奶中牛基因组 DNA 的提取方法

摘要：

采用不同的解冻方法以及牛奶体细胞分离与 SDS 苯酚法相结合的手段，分离提取－80℃冻藏牛奶中牛基因组 DNA，利用超微量核酸分析仪和琼脂糖凝胶电泳法分别对 DNA 浓度、纯度及分子量大小进行检测，采用 PCR 技术扩增牛特异性基因序列片段进行 DNA 质量鉴定。结果表明，“两步法”解冻提取的牛基因组 DNA 的质量优于“一步法”和“三步法”，且该方法所提取的 DNA 浓度为（52．46±2．40）μg／mL，DNA 纯度为1．85±0．80，条带较清晰；PCR 扩增证实这些 DNA 可以成功扩增出729 bp 的牛特异性基因序列片段。本研究成功优化了牛奶中 DNA 的分离提取方法，筛选出了冻藏牛奶的适宜解冻方法，建立了一种新的超低温冻藏牛奶中牛基因组 DNA 提取方法。

关键词：牛奶、解冻方法、DNA 提取、PCR

分类号：Q523(核酸)

资助基金：陕西省青年科技新星项目2014KJXX-51；陕西省农业科技攻关项目2014K01-19-02；中央高校基本科研业务费专项资金GK201502008；中国博士后科学基金2015M570811

在线出版日期：2015-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：94-99