10.3969/j.issn.1671-8151.2016.12.008
基于 SRAP-PCR 技术开发荞麦种间特异标记及相关序列分析
[目的]荞麦种质资源繁多,天然的自交不亲和特性使甜荞繁殖的种子存在一定程度的杂合。而苦荞的自交亲和特性又使其繁殖种子世代生殖隔离。为开发鉴别不同荞麦品种以及种子纯度特异分子标记。[方法]基于 SRAP-PCR 技术,根据40个荞麦品种间 DNA 多态性位点,将种间差异 PCR 扩增位点的 DNA 带回收测序,生物信息学分析其序列特征。[结果]克隆了8个种间多态性位点;经核酸序列分析,仅有2个差异 PCR 扩增位点序列包含 SRAP-PCR 扩增的上下游引物序列,分别暂时命名为8802-1和 M 化5;其他位点分析表明均为单引物扩增序列。其中,8802-1位点核酸序列长度为705 bp,包含3个常用酶切位点;预测到1个 ORF 区,所编码的氨基酸序列经 BLASTP比对分析,未找到任何与蛋白质数据库中同源的氨基酸序列。M 化5位点核酸序列长度为687 bp,包含3个酶切位点和2个 ORF,经 BLASTP 比对分析,预测第2个 ORF 编码的氨基酸序列与拟南芥的反转座子蛋白同源性为71%,推断该序列为包含一个反转座子元件的基因。[结论]本研究获得了2个品种特异位点序列,其中一个位点序列包含编码的反转座子元件,另一个为冗余的基因组序列,可进一步将这两个序列开发为 STS 标记,应用于荞麦种质资源遗传多样性分析、种子纯度鉴定、遗传图谱构建和分子标记辅助育种。
甜荞、DNA 多态性位点、SRAP-PCR 技术、分子标记
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S515;Q94(禾谷类作物)
国家自然科学基金NSFC:31301385;山西省科技攻关项目20150311007-1
2016-12-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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