蝽类昆虫干制标本基因组提取及相关基因扩增

摘要：

本文以辉蝽（Carbula humerigera）（半翅目：蝽科）为实验材料，研究蝽科昆虫干制标本基因组的提取并扩增相关基因。通过 CTAB 法、SA 裂解法及吸附柱法，对50头辉蝽干制标本进行了基因组提取试验，并针对 mtDNA 的COI 基因部分片段和 nrDNA 的 ITS2基因部分片段进行 PCR 扩增，共获得 COI 序列6条，ITS2序列33条。结果表明，核基因中的 ITS2基因扩增效果相对较好，而线粒体中的 COI 基因扩增效果并不理想。通过对 PCR 产物电泳，结果显示，1994－2008年的干制标本，3种基因组提取方法均可行，且已获得基因序列无明显差别；1974－1989年的干制标本，SA 裂解法所造成的核酸损失大，提取效果不理想，而 CTAB 法、吸附柱法效果明显。由于 CTAB 法耗时较长、对实验材料需求量大、破坏较强且涉及如β‐巯基乙醇等有毒试剂，SA 法对基因组损失太大且杂质保留较多，所以提取蝽科干制标本及扩增相关基因的最优方法为二氧化硅膜吸附柱法。

关键词：干制标本、基因提取、基因扩增

分类号：S433.3(病虫害及其防治)

资助基金：国家自然基金31440078;山西省教育厅高等学校科技创新基金2014131;山西农业大学科技创新基金2014017

在线出版日期：2015-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：478-483